Urocultivo y Cultivo de Secreciones Genitales. Informe Final

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  UROCULTIVO Y CULTIVO DE SECRECIONES GENITALES M. ACOSTA, T. ARGÜELLO, R. AVILA, J. CÁCERES, A. CAPDEVILA, E. CARDENAS, J. DOMÍNGUEZ, D. GUERREÑO, L. LEGUIZAMÓN, A. LÓPEZ, Y. PALMA, M. PALOMINO, J. SANABRIA, G. SBBARDELOTO, F. SILVA. Cátedra de Microbiología y Parasitología. Universidad Nuestra Señora de la Asunción. Asunción, Paraguay. RESUMEN El urocultivo se utiliza para diagnosticar una infección urinaria. Es la infección más común tanto en el ámbito extrahospitalario como en el hospitalario
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  UROCULTIVO Y CULTIVO DE SECRECIONES GENITALES M. ACOSTA, T. ARGÜELLO, R. AVILA, J. CÁCERES, A. CAPDEVILA, E. CARDENAS, J. DOMÍNGUEZ,D. GUERREÑO, L. LEGUIZAMÓN, A. LÓPEZ, Y. PALMA, M. PALOMINO, J. SANABRIA, G.SBBARDELOTO, F. SILVA.Cátedra de Microbiología y Parasitología. Universidad Nuestra Señora de la Asunción.Asunción, Paraguay. RESUMEN El urocultivo se utiliza para diagnosticar una infección urinaria. Es la infección más comúntanto en el ámbito extrahospitalario como en el hospitalario pudiendo ser sintomática oasintomática. El método utilizado es un cultivo cuantitativo aeróbico en medio selectivo y noselectivo. El análisis bacteriológico de las secreciones genitales permite detectar e identificarlas bacterias responsables de infecciones genitales, así como enfermedades de transmisiónsexual. El examen microscópico de la flora es seguido la mayoría de las veces por el cultivo enbúsqueda de los gérmenes responsables. Los métodos utilizados son cultivo en mediosselectivos y enriquecidos; y las tinciones específicas. Estos análisis son completados por unantibiograma en ciertos casos.En el año 2013 hemos realizado un estudio observacional en el cual nuestros objetivos hansido observar el procesamiento de las muestras de orina para urocultivo de acuerdo a métodosestandarizados, del mismo modo observar también el procesamiento de muestras desecreciones del aparato genital y al mismo tiempo realizar un paralelismo en la realización deestos cultivos en el servicio médico privado y el público. PALABRAS CLAVES: Infecciones urinarias. Urocultivo. Infecciones genitales. Enfermedades detransmisión sexual. Cultivo se secreciones de aparato genital. Secreción uretral. Secreción vaginal.Secreción cervical. Secreción perianal. INTRODUCCION Ante una sospecha de infección urinaria estaría indicado en la mayoría de los casos realizar unurocultivo y un antibiograma, que nos confirmen la presencia de infección, nos identifique elgermen responsable y los antibióticos eficaces 1 .El análisis bacteriológico de las secreciones genitales permite detectar e identificar lasbacterias responsables de infecciones genitales, así como enfermedades de transmisiónsexual.El examen microscópico de la flora es seguido la mayoría de las veces por el cultivo enbúsqueda de los gérmenes responsables. Estos análisis son completados por un antibiogramaen ciertos casos 2 .    ORINA    UROCULTIVO El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del tracto urinario oinfección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con riesgo de infección.Está basada en la presencia de un número significativo de bacterias (generalmente >100.000bacterias/ml.) La piuria, junto con la bacteriuria, es un dato muy importante para eldiagnóstico de infección del tracto urinario, ya que prácticamente está presente en todas lasinfecciones urinarias. Una excepción es la bacteriuria asintomática en la que la piuria puedeestar ausente. 1.   Agentes etiológicos a investigar rutinariamente    Escherichia coli    Klebsiella spp.    Enterobacter spp.    Serratia spp.    Enterococus spp.    Proteus spp.    Pseudomonas spp.    Acinetobacter spp.    Candida spp.    Staphylococus spp.    Estreptococo grupo B (imprescindible en embarazadas) 2.   Recogida de muestras Para la recogida, transporte y manipulación de muestras podrán tenerse en cuenta losprotocolos establecidos por la SEIMC. La correcta recogida y conservación de la orina paraurocultivos es fundamental para que puedan obtenerse resultados fiables.Los puntos clave son:    Mujeres: Obtención de la orina después de separar los labios vaginales de manera queel chorro de orina no toque genitales externos.    Hombres: Retracción del prepucio de manera que el chorro de orina salgadirectamente 3-4 . 3.   Examen microscópico El procedimiento elegido debe permitir:    Recuento de leucocitos al menos semicuantitativo    Detección de células epiteliales (CE): su presencia indica muy probablementecontaminación de la muestra por contacto con genitales externos. Ante un resultado  (urocultivo) positivo si se observa presencia de células epiteliales debe pedirse nuevamuestra para confirmar. 4.   Cultivo Debe permitir el aislamiento y el recuento cuantitativo desde 1.000 ó 10.000 UnidadesFormadoras de Colonias (UFC)/ml. de los uropatógenos más comunes.Se sembrará cuantitativamente, generalmente con asa calibrada de 1 ó 10 µl. en uno de lossiguientes medios en placa:    Placa agar Mac Conkey: es un medio de cultivo selectivo y diferencial usado para elaislamiento y estudio de bacilos gram negativos.    Placa de agar cromógeno para orina: es un medio de cultivo que permite el desarrollode bacterias gram positivas y negativas, además de levaduras, y diferencia por aspectoy color los distintos géneros o grupos bacterianos.    Placa de agar sangre: medio de cultivo enriquecido y no selectivo que permite elcrecimiento de la mayoría de las bacterias habituales y levaduras.    Asas calibradas: asas estériles usadas para la siembra de un inóculo conocido yestandarizado de la muestra de orina. 5.   Procedimiento    Recepción, ingreso y numeración: se sigue el procedimiento común de muestrasmicrobiológicas.    Siembra:    La muestra debe ser sembrada dentro de 2 hrs de haber sido tomada, si semantiene a tº ambiente; si la muestra se ha mantenido refrigerada puede sersembrada hasta dentro de 4 hrs.    Orinas de 2ª micción y por catéter permanente: primero se debe agitar bien lamuestra con movimientos suaves para homogeneizarla, se introduce asainmediatamente por debajo de la superficie líquida y se toma una gota con asade 1 µL, llevarla en forma vertical y sembrar en placa de agar cromógeno paraorina, haciendo una línea central y luego pasando en forma horizontal el asadesde el inicio de la línea hasta el final de ella, sin cortar los trazos (comozigzag). Se siembran de 4 a 6 muestras por placa.    En forma paralela a la siembra de la muestra de orina se realiza frotis paratinción de gram, se puede fijar hasta 10 orinas en una lámina y se usa para elloel asa calibrada de 1 µL. Estas se tiñen y pueden ser observadas cuando existadiscordancia entre el cultivo y el sedimento y cuando no exista sedimento.    Orina por sondeo: proceder de la misma manera que orina de 2º chorro, yagregar además siembra con asa de 10 µL, en placas de agar sangre y agar MacConkey, de la misma forma explicada anteriormente.    Orina por punción vesical: Siembre con asa de 10 µL, en placa de agarcromógeno para orina de la misma forma explicada anteriormente. Ademássembrar con pipeta de vidrio aprox. 0,1 ml diseminando con bagueta de vidrioen rastrillo por toda la superficie de una placa de agar sangre y agar MacConkey     Orina tomada directamente de uréter o riñón (de pabellón): se siembra conpipeta en agar sangre y agar Mac Conkey (como una secreción), se diseminacon bagueta de vidrio estéril en rastrillo, no se evalúa recuento.    Incubación en estufa de cultivo a 35° a 37ºC a atmósfera normal por 18 a 24 hrs.    Las muestras de orina deben guardarse refrigeradas hasta obtener el resultado del cultivo.En caso de resultados discordantes se recurrirá a la muestra almacenada para repetir losanálisis.    Las placas de urocultivos incubadas “overnight” son examinadas por Tecnólogo Médico para determinar presencia o ausencia de crecimiento, y decidir estudio. En los cultivospositivos se determina recuento de colonias, identificación de microorganismo y estudiode susceptibilidad según criterios de interpretación 5 . 6.   Lectura de cultivo en UFC/ml:    Menos de 1.000 ó 10.000 UFC, se informará: “Menos de 1.000 ó 10.000 UFC/ml”.    De 10.000 a 100.000 UFC.    Un patógeno sin células epiteliales: informar microorganismo, número decolonias, antibiograma y valorar clínicamente    Dos patógenos: informar microorganismos, número de colonias y solicitarnueva muestra.    Más de dos patógenos: informar “Cultivo mixto, probable contaminación”.      100.000 ó más UFC:    Uno o dos patógenos: informar identificación más antibiograma    Más de dos especies: informar “cultivo mixto, probable contaminación”. 7.   Tiempo de respuesta:    Cultivo negativo a las 48 horas    Cultivo positivo: 48 a 72 hrs. hábiles 8. Informe:    Cultivo negativo a las 48 horas    Cultivo polimicrobiano: si existe desarrollo de 3 o más bacterias se inform a “Resultadopolimicrobiano”    Cultivo positivo: se informa recuento de colonias aproximado hasta 100.000 unidadesformadoras de colonia por mL (UFC/mL). Recuentos mayores de 100.000 se informan>100.000 UFC/mL    Calidad de toma muestra: se evalúa indicador muestras urocultivo polimicrobianas /total urocultivos por servicio de procedencia. Ver Procedimiento de Control de Calidadde Microbiología 6 . 9.   Situaciones especiales    En embarazadas adicionar (sembrando con escobillón) medio de Granada o Agarsangre nalidíxico. El primero se incubará en anaerobiosis (o bajo un cubre) y elsegundo en 5-7% CO2. Estreptococo grupo B en embarazadas, se informará encualquier cantidad.
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