Practica 10. Determinacion de Colesterol

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  Laboratorio de Bioquímica II Practica # 10. Determinación de colesterol sérico y HDL colesterol Universidad Autónoma de Ciudad Juárez – Instituto de Ciencias Biomédicas Licenciatura en Química – Laboratorio de Bioquímica II Adriana Lucely Euan Ku 91883 – Equipo No. 4 Introducción Los lípidos se clasifican de acuerdo a si son saponificables o no saponificables, dentro de esta ultima clasificación se encuentra los esteroles al cual pertenece el colesterol, este lípido se encuentra en tejidos cor
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  Laboratorio de Bioquímica II   Adriana Lucely Euan Ku - 91883 Página 1 Practica # 10. Determinación de colesterol sérico y HDL colesterol Universidad Autónoma de Ciudad Juárez  –  Instituto de Ciencias BiomédicasLicenciatura en Química  –  Laboratorio de Bioquímica IIAdriana Lucely Euan Ku 91883  –  Equipo No. 4 Introducción Los lípidos se clasifican de acuerdo a sison saponificables o no saponificables, dentrode esta ultima clasificación se encuentra losesteroles al cual pertenece el colesterol, estelípido se encuentra en tejidos corporales y en elplasma sanguíneo de lo vertebrados. Seencuentra en altas concentraciones en el hígado,medula espinal, páncreas y cerebro. Desempeñadiversas funciones dentro del cuerpo humano,ya se estructural y como precursor de lavitamina D, hormonas sexuales, hormonascorticoesteroidales, sales biliares y de las balsasde lípidos 2 .Debido a su insolubilidad en agua, elcolesterol plasmático solo existe en la forma decomplejo llamado lipoproteínas, principalmenteLDL y HDL, que tiene la capacidad de fijar ytransportar grandes cantidades de colesterol; elprimero se relaciona mucho con laarteriosclerosis. Las lipoproteínas plasmáticas   son partículas que solubilizan y transportan elcolesterol en el torrente sanguíneo. La funciónprincipal de las lipoproteínas de alta densidad o   HDL en el metabolismo lipídico es la captacióny transporte de colesterol desde los tejidosperiféricos al hígado en un proceso conocido   como transporte reverso de colesterol(mecanismo cardioprotectivo). El HDLcolesterol bajo, está asociado con un alto riesgo   de enfermedad cardíaca. Por este motivo ladeterminación de HDL colesterol es unaherramienta útil en la identificación deindividuos de alto riesgo 1 .La concentración aceptada como normalde colesterol en plasma sanguíneo(colesterolemia) de personas sanas es de 150 a280 mg/dL, sin embargo varían mucho lasconcentraciones. Cuando la concentraciónaumenta se habla de hipercolesterolemia 1 . Objetivo Determinar la concentración de colesterol totalsérico y el de HDL, y su influencia enimplicaciones clínicas Materiales y reactivos    Suero    Solución patrón     Reactivo de colesterol    Sobrenadante II  Metodología Reactivos(ml)BlancoPatrón HDL P 1 P 2 P 3Suero(ml)--- --- --- 0.05 0.05 0.05Patrón(ml)--- 0.05 --- --- --- ----Agua(ml)0.05 --- --- --- --- ---Sobrenadante II--- ---- 0.05 --- --- ---RColesterol(ml)2 2 2 2 2 2 Para preprara el sobrenadante: se tomó0.05 ml de suero + 0.05 ml de reactivoprecipitante de HDL- COLESTEROL, semezcló , se dejo reposar 5 min y secentrifugó 5 min a 3000 rpmSe prepararon 6 tubo de acuerdo ala sigueiente tablaTodos los tubo se mezclaron y se dej ó que selleve a cabo la reaccion durante 20 min y seanadi ó 0.2 ml de H 2 SO 4  Todo lo anterior se realizo sobre hielo yluego se ó suavementeSe leyeron las absorbancias a una longitudde onda de 640 nm  Laboratorio de Bioquímica II   Adriana Lucely Euan Ku - 91883 Página 2 Cálculos [Colesterol T]=Abs Prob/Abs patrón x [patrón][HDL colest.]=absProb/abs patrón x [patrón]Factor de riesgo coronario=colesterol T/HDL Resultados Tabla 1. Absorbancias de los diferentes parámetrosmedidos Parámetros Absorbancia Blanco 0Patrón 0.012HDL-colesterol 0.150Problema 1 0.162Problema 2 0.152Problema 3 0.173 Tabla 2. Resultado de los diferentes parámetrosdeterminados   Parámetros Resultados (mg/dL) Problema 1 2491.08Problema 2 2267.33Problema 3 2580.58HDL colesterol (p. 2) 2237.5   FRC 1.013 Discusión De acuerdo con los resultados obtenidoses posible observar que los valores de las tresmuestras problemas están mu fuera del rangonormal (> 280 mg/dL) 2 , debido a que hubo unafalla en el equipo (espectrofotómetro) y por esolos resultados de las Absorbancias nos arrojaronvalores indeseados, lo mismo que para elpatrón, al salir muy baja la Absorbancia(0.012). Ver tabla 1 y 2.De acuerdo a la bibliografía los valoresde referencia de colesterolemia son: por debajode los 200 mg/dL es la concentración deseableya que se relaciona con un bajo riesgo deenfermedad cardiovascular, cuando los valoresestán entre los 240 y 270 mg/dl hay un riesgointermedio y, cuando es mayor a los 280 mg/dLse dice que hay un alto riesgo cardiovascularmuy alto, por ello es recomendando iniciar uncambio en el estilo de vida (dieta y ejercicio) 1 .Los valores normales de colesterol HDL son de40-60 mg/dL, sin embargo si los valoressobrepasan un poco, es muy aceptable debido aque las HDL son consideradas como FactorProtector, ya que es el encargado de recolectarel colesterol de los tejidos y llevarlos al hígadopara su procesamiento, por otro lado están lasLDL (Low Density Lipoproteín), consideradascomo Factor de Riesgo y cuyos valores estánpor debajo de los 140 mg/dL.Con respecto al factor de riesgocoronario, el valor es muy bajo (1.033 mg/dL)lo que indica que no se relaciona con un factorde riesgo cardiovascular, sin embargo elpromedio normal en hombres es de 3.43 y enmujeres de 3.27. Conclusión El colesterol sérico total tiene unautilidad comprobada en el diagnóstico dehiperlipoproteinemia, arteriosclerosis,   enfermedades hepáticas y tiroidales. Elcolesterol total y el colesterol HDL, junto conuna determinación de triglicérido proveen una   información valiosa para la predicción de laenfermedad coronaria del corazón, y para elgenotipo de lipoproteína de acuerdo a laclasificación de Fredickson.Altos niveles de colesterol se asocian ariesgo de padecer enfermedadescardiovasculares, en especial aquel unido a lasLDL (colesterol malo), en cambio el colesterolHDL (colesterol bueno) se transporta al hígadopara su metabolización y excreción por víabiliar y por tanto no se asocia con riesgo deenfermedades coronarias . Bibliografía 1. Ferri, Fred. Consultor Clínico de MedicinaInterna: Claves Diagnosticas y Tratamientos.Editorial Océano Mosby. Cuarta edición.Barcelona, España. 2006. Pág.421, 12712. Murray, Robert; Mayes, Peter A, et al.Harper, Bioquímica Ilustrada. Editorial ManualModerno. 16ª Edición. México, D.F. 2005. Pág.125, 131.
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