Cromatografia de Capa Fina Practica #1

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  cromatografia de capa fina
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  CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.  Yacelis Díaz Causil, Luz Cenith Tapia Martínez, Rafael miranda UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA. FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS PROGRAMA DE QUÍMICA. MONTERÍA-CORDOBA 2015 yamadica@hotmail.com  ——————————————————————————————————————    RESUMEN Para observar el fundamento y la naturaleza de las separaciones en cromatografía plana, el análisis cualitativo se realizó empleando el método de cromatografía de capa fina, el cual muestra que a medida que asciende la fase móvil constituida por una mezcla de solvente por acción de capilaridad, arrastra los componentes de una tinta de marcador y lapicero, a través de una capa fina. En el cual se usaron patrones (acetona, etanol, cloroformo, acetato de etilo) para encontrar valores estandarizados de Rf e identificar y calcular la concentración de una muestra problema.   ABSTRACT To observe the foundation and the nature of the separations in planar chromatography, qualitative analysis was performed using the method of thin layer chromatography, which shows that as it ascends the mobile phase consisting of a mixture of solvent by capillary action, drag the components of a marker ink and pencil, through a thin layer. Patterns (acetone, ethanol, chloroform, ethyl acetate) were used in which Rf standardized to find and identify and calculate the concentration of an assay sample values. INTRODUCCIÓN Cromatografía en capa fina  Aunque la cromatografía en papel ha sido un valiosísimo factor de progreso en todos los campos de la biología y la química, el solo uso de la celulosa como fase estacionaria le impone gran limitación técnica, ya que el papel es insatisfactorio para todas las separaciones (por ejemplo sustancias hidrófobas). Por lo tanto los investigadores buscaron la forma de emplear los adsorbentes, que tan útiles habían probado ser en el método de columna de tswett, en una forma laminar conveniente, análoga a la del papel. Después de varios intentos, se desarrolló y adopto mundialmente la cromatografía en capa fina. En ella se opera como sigue: El adsorbente se mezcla con un aglutinante, a menudo yeso; esta mezcla se suspende en agua y se deposita sobre una placa de vidrio o sobre una superficie plana rígida, metálica o de un material plástico, por medio de un dispositivo embadurnador apropiado. Al  secarse, la suspensión que adherida a la placa de vidrio, bien directamente o por acción del aglutinante, como una capa delegada y rugosa de adsorbente en un espesor apropiado para la separación. La separación depende de las propiedades adsorbentes de la capa. Los aspectos técnicos (aplicación de la muestra, desarrollo de la placa, localización, determinaciones cuantitativas etc.,) de la cromatografía en papel y en capa fina son muy parecidos.  Además de los adsorbentes tradicionales, hay técnicas basadas en el empleo de capas de cambiadores iónicos, geles de filtración y sólidos recubiertos de líquidos. Actualmente se usan estos materiales y sus combinaciones,  juntos con muchas variedades de disolventes, en la separación de todo tipo de compuestos. Lo anterior hace de la cromatografía en capa fina un método analítico versátil, sensiblemente alto grado y rápido para separar en forma bien definida compuestos estructuralmente muy parecidos. METODOLOGIA Para cromatografía en capa fina se utilizó como disolvente; acetona, etanol, cloroformo.   Se midió con una pipeta de 10mL, de acetona, luego se midió con una pipeta de 10 ml etanol, 10 ml acetato de etilo. Posteriormente se adicionaron a un Beacker de 100mL, esto constituye a la fase Móvil.   Sembramos las soluciones patrones (tinta de lapicero) en una placa con un tubo capilar.   La placa fue depositada en un Beacker el cual contenía el sistema (disolvente).   Se tapó la solución con un vidrio de reloj (figura 1). Figura 1.   Se dejó en reposo hasta el momento de la elución.   Después de haber secado la placa, se sometió a una solución de iodo (agente revelador).   Después de la revelación sacamos las placas y se marcaron las manchas con lápiz. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Cromatografía en capa fina; OBSERVACION La distancia que se tomó desde la línea de toque con respecto al borde inferior de la placa fue de 0,5 cm, Y El intervalo que se estableció para el recorrido durante la separación fue de 5.5 cm Para determinar el RF en las pruebas se utilizó la siguiente ecuación  Rf = Distancia recorrida por el compuesto / Distancia recorrida por el disolvente Eluyente Tiempo de separación Acetona 6:22.68 Acetato de etilo 8:30.77 Etanol 21:10.11 Mancha de lapicero en etanol RF: 0.90  mancha de referencia Mancha de lapicero en acetato de etilo: RF: 1.0  mancha de referencia Mancha de lapicero en acetona: RF: 0.96  mancha de referencia Color de la mancha Distancia recorrida (cm) RF Morado 0.18  Negro 0.27 Amarillo 0.34 fucsia 0.41 Amarillo débil 0.90 Color de la mancha Distancia recorrida (cm) RF Morado 2.0 0.36 Rosa 2.4 0.43 Amarillo 4.2 0.76 Color de la mancha Distancia recorrida (cm) RF Negro 0.3 0.05 Fucsia 0.7 0.0.12 Morado 2 0.36 Gris 5.5 1    En esta práctica constatamos que la polaridad es un factor que demostró que la tinta de lapicero es mucho más y que los de RF de las sustancias en distintos eluyentes se observó tal comportamiento. Como se sabe entre más polar sea el componente más demora en desplazarse o separarse en la placa ya que la polaridad de la especie absorbente es mayor respecto al eluyente. Nota: cabe aclarar que no se pudo finalizar con éxito la practica propuesta debido a falta de equipo por lo tanto solo se trabajó con la muestra de tinta. CUESTIONARIO ¿qué factores influyen en una separación por cromatografía en capa fina ? Polaridad La diferencia de velocidad con la cual los componentes recorren la placa se debe por lo general a la estructura de cada molécula así como también a los distintos grupos funcionales que esta tenga. Esta diferencia se debe a la polaridad puesto que las las moléculas más polares poseen una mayor retención al absorbente o fase estacionaria y por ende migraran más lento mientras que las que son menos polares saldrán de manera rápida. Elección del eluyente La elección del eluyente es muy relevante pues este es de gran
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