ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y ANTIINFLAMATORIA DE LOS FLAVONOIDES AISLADOS DE LAS HOJAS DE SATUREJA BREVICALIX EPL

Please download to get full document.

View again

All materials on our website are shared by users. If you have any questions about copyright issues, please report us to resolve them. We are always happy to assist you.
 19
 
  , pp FARMACIA ACTIVIDAD ANTIXIDANTE Y ANTIINFLAMATRIA DE LS FLAVNIDES AISLADS DE LAS HJAS DE SATUREJA BREVICALIX EPL ANTIXIDANT AND ANTI-INFLAMMATRY ACTIVITY F FLAVNIDS ISLATED FRM LEAVES F SAVRY
Related documents
Share
Transcript
, pp FARMACIA ACTIVIDAD ANTIXIDANTE Y ANTIINFLAMATRIA DE LS FLAVNIDES AISLADS DE LAS HJAS DE SATUREJA BREVICALIX EPL ANTIXIDANT AND ANTI-INFLAMMATRY ACTIVITY F FLAVNIDS ISLATED FRM LEAVES F SAVRY BREVICALIX EPL Enrique Javier Aguilar Felices1 RESUMEN Los objetivos fueron aislar los flavonoides de las hojas de Satureja brevicalix Epl. wayra muña y determinar su actividad antioxidante y antiinflamatoria, con muestra recolectada en el distrito de Quinua, provincia de Huamanga, región de Ayacucho, en los Laboratorios del Área de Farmacia de la UNSCH, durante los meses de enero a diciembre del Material y método: el aislamiento de los flavonoides se realizó según el procedimiento descrito por Aguilar y Lock de Ugaz, la elucidación estructural se realizó por espectroscopia ultravioleta e infrarrojo. La actividad antioxidante se determinó utilizando la capacidad secuestradora del radical libre DPPH y para la actividad antiinflamatoria se usó el modelo de edema plantar inducido por carragenina en ratas. Resultados: Se aisló dos flavonoides que fueron identificados como la apigenina como el más importante y la naringenina en menor proporción, ellos demostraron tener actividad antoxidante mayor del 90%, superior a la rutina y ligeramente inferior a la vitamina C; asimismo, demostraron tener actividad antiinflamatoria a la dosis de 200 mg/kg similar al diclofenaco (p 0.05). Conclusiones: Los flavonoides presentes en las hojas de Satureja brevicalix Epl. apigenina y naringenina, demostraron tener actividad antioxidante y antiinflamatoria. Palabras Clave: Actividad antioxidante y antiinflamatori, flavonoides, satureja brevicalix epl. ABSTRACT The bjectives was this work was carried out with the purpose to isolate the flavonoids of the leaf from Satureja brevicalix Epl. and to determine both the antioxidant and antiinflammatory activity with sample collected in Quinua's district, in the Pharmacy's Laboratory from UNSCH, during the January to December months of Material and methods: For the isolation the flavonoids was used the methodology reported for Aguilar and Lock de Ugaz, the structural elucidation was determined by the ultraviolet and infrarred spectroscopie. The antioxidant activity was performed using the scavenging capacity of the free radical DPPH and the antiinflammatory was determined using the paw oedema induced by carrageenaan in rats. Results: It was isolated two flavonoids which were identified as the apigenin as the most important and the naringenin in minor importance. They demonstrated to have antioxidant activity more 90%, it was superior than the rutin but minor that the ascorbic acid, also, they demonstrated to have antiinflammatory activity at 200 mg/kg dose (p 0.05), which was very Recibido: 28 octubre del 2014, Aprobado: 28 de noviembre del Docente de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga 407 simmilar to diclofenac. Conclusions: The flavonoids presents in the leaf from Satureja brevicalix Epl. apigenin and naringenin had demonstrated to have antioxidant and antiinflammatory activity. Key words: Antioxidant activity, antiinflammatory, flavonoids, satureja brevicalix Epl. INTRDUCCIÓN MATERIAL Y MÉTDS Satureja brevicalix Epl. wayra muña, es una especie nativa de los Andes Sudamericanos, conocida por sus propiedades analgésicas y digestivas (1)(2). En el Perú, se desarrolla en las montañas secas y pedregopedregosas, particularmente de las regiones altoandinas sureñas (3). Contiene resinas, azúcares reductores, catequinas, lactonas sesquiterpénicas, triterpenos, esteroides, soponinas, taninos, flavonoides y aceite esencial. Se ha demostrado su actividad antiinflamatoria y analgésica (4), su actividad antiespasmódica(5), actividad antioxidante (6) y actividad hepatoprotectora (7); atribuyéndole estas propiedades a los flavonoides. Los flavonoides son un grupo grande de metabolitos secundarios de tipo fenólico, existiendo varios tipos como flavanonas, flavanonoles, flavonas y flavonoles entre otros, con variada actividad farmacológica entre las que destacan: antioxidante, antiínflamatoria, antiespasmódica, antimicrobiana, citoprotectora, analgésica, antiespasmódica (8) (9), están presentes en el género Satureja y han sido descritos ampliamente en la literatura, destacando flavanonas como la naringenina y eriodictol, flavonas como la luteolina y flavonoles como la kaenferol y quercetina (10) (11) (12) (13). La investigación se desarrolló en los laboratorios de farmacognosia y farmacología del área de Farmacia, de la facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga, durante los meses de enero a diciembre del Siendo Satureja brevicalix Epling, una especie ampliamente utilizada en nuestra región y conociéndose la presencia de flavonoides, en el presente trabajo de investigación se ha propuesto aislarlos mediantes técnicas cromatográficas, proponer su estructura química, utilizando técnicas espectrales ultravioleta e infrarrojo y determinar su actividad antioxidante y antiinflamatoria, relacionándolo con su estructura química. 408 Muestra: hojas de Satureja brevicalix Epling colectada en el distrito de Quinua durante los meses de marzo a abril en estado de floración. Material Biológico: 25 ratas albinas machos de raza Holtzman de peso entre 180 a 250 g. en buen estado de salud, adquiridas en el Bioterio del Instituto Nacional de Salud (Chorrillos Lima), con una semana de anticipación para su adecuación a las condiciones de laboratorio, con alimento pelletizado estándar y agua a voluntad. Técnica de Extracción de Flavonoides: Se utilizó 400 g de muestra y se realizó una extracción hidroalcohólica con dos litros de etanol al 80% se filtró y evaporó a sequedad en un evaporador rotatorio BUCHI 300. El extracto seco fue resuspendido en agua destilada, desengrasado con éter de petróleo y extraído sucesivamente con cloroformo, acetato de etilo y metanol. Los flavonoides se concentran en la fracción de acetato de etilo, el mismo que fue evidenciado con la prueba de Shinoda (14). Aislamiento de los flavonoides: Se realizó una cromatografía en columna flash y como eluyente se utilizó una mezcla de cloroformo: metanol (15). Las fracciones que contenían flavonoides fueron evidenciadas mediante las pruebas de Revista IN CRESCEND - Ciencias de la Salud - Vol. 01, No 02, 2014 Shinoda, cloruro férrico al 5% y amoniaco al 25%. Con las fracciones que evidenciaron diferentes tipos de flavonoides se realizó una cromatografía en capa fina en una placa cromatográfica de 20 x 20 conteniendo Silicagel G 254 (Merck) y como sistema de solvente Butanol: ácido acético: agua (4:1:5), los flavonoides fueron localizados con la ayuda de la luz ultravioleta. Cada una de las bandas fue recuperada, disuelta en metanol y filtrada para las pruebas espectrales en un Espectrofotometro Ultravioleta GENESYS en el rango de 200 a 500 nm. y un Espectrofotometro Infrarrojo VARIANT con arreglo de diodos, reportándose los resultados trasmitancia vs cm-1 (14) (16). Ensayos Biológicos: Actividad secuestradora del radical 1, 1,difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH) (17). La técnica emplea el DPPH, se basa en la desaparición del color violeta a amarillo pálido por la reacción de la sustancia antioxidante, pudiendo cuantificarse la reacción espectrofotometricamente a 515 nm, con lo que se determina el porcentaje de inhibición del radical DPPH, utilizándose la rutina como flavonoide estándar y a la vitamina C inyección del polisacárido sulfatado extraído del alga Chondrus Crispus (λ-carragenina), cuyo signo principal es la formación del edema en la pata posterior derecha de la rata, el cual es medido en un pletisnómetro. Diseño Experimental: Los animales fueron distribuidos al azar en 5 grupos de 5 animales cada uno para formar los siguientes grupos: Grupo I: constituído el Blanco, al cual se le inyectó carragenina 0.1% y carboximetilcelulosa (CMC) al 0.1% por vía oral, Grupo II: constituyó el Control, al cual se le administró Diclofenaco 20 mg/kg 30 minutos después de la administración de carragenina 0.1%, Grupo III, IV y V: se administró 25 mg/kg, 50 mg/ kg y 100 mg/kg de flavonoides en CMC 0.1% respectivamente, 30 minutos después de la administración de carragenina. Análisis de datos: Los datos fueron organizados en una matriz para calcular la media y la desviación estándar, asimismo, serán graficados en forma de histogramas y barras de error. La significancia estadística entre los tratamientos será determinada mediante el análisis de varianza y la Prueba de Tukey con un nivel de significancia al 95% Actividad Antiinflamatoria(18) Edema Plantar inducido por carragenina Se basa en la inducción de la inflamación por RESULTADS TABLA 1. CARACTERÍSTICAS ESPECTRALES ULTRAVILETA E INFRARRJ DE LS FLAVNIDES AISLADS DE LAS HJAS DE SATUREJA BREVICALIX WAYRA MUÑA. Compuesto Datos Espectrales Ultravioleta (nm) Apigenina 224, 279, 340 Naringenina 282, 330 Infrarrojo (cm-1) 3337, 2943, 2831, 2360, 1653, 1450, 1416, 1115, , 2944, 2832, 2521, 2227, 1660, 1450, 1414, 1114, H H Apigenina Naringenina ug/ml % de captación del DPPH 98 TABLA 1. Características espectrales ultravioleta e infrarrojo de los flavonoides aislados de las hojas de Satureja brevicalix wayra muña. Ayacucho ug/ml 10 ug/ml S. brevicalix Rutina Vitamina C Tratamientos Figura 2. Variación del volumen de inflamación en función del tiempo por efecto de los flavonoides aislados de las hojas de Satureja brevicalix Epling wayra muña. Ayacucho Volumen de Inflamación (ml) Carragenina 0.1% Diclofenaco 20 mg/kg mg/kg 100 mg/kg mg/kg Tiempo (Horas) 410 Revista IN CRESCEND - Ciencias de la Salud - Vol. 01, No 02, DISCUSIÓN La caracterización de los flavonoides aislados por procedimientos cromatográficos se realizó por espectroscopia ultravioleta e infrarroja (Tabla 1). El primer compuesto aislado tuvo una absorbancia máxima al ultravioleta de 224, 279 y 340 nm. respecetiva1 mente y al infrarrojo un pico a 3337 cm- que significan la presencia de varios hidróxilos fenólicos unidos a una instauración en el anillo C y a 1653 cm-1 del núcleo γ-pirona del anillo C del flavonoide, estos datos corresponden a la flavona apigenina. El otro compuesto mostró picos máximos a 270 y 329 nm respectivamente y al infrarrojo un pico a cm- que significan la presencia de varios hidróxilos fenólicos y a 1663 cm-1 del núcleo γ-pirona del anillo C del flavonoi- de, estos datos corresponde a la flavanona naringenina. Asimismo, por resultados cromatográficos y de absorbancia la apigenina es el flavonoide principal en las hojas de Satureja brevicalix Epl. ; describen las características espectrales al infrarrojo para la apigenina, resultando similares al reportado en el presente trabajo (19) (20), realizaron el aislamiento de flavonoides y otros compuestos fenólicos de las hojas de Satureja hortensis, reportando la presencia de apigenina (λnm = 336, 269), el espectro es similar al reportado en el presente trabajo, por tanto, se asume que uno de los flavonoides aislados corresponde a la apigenina. Por otro lado, es reportada la presencia de la flavanona naringenina por Escudero y col. (1985) y por Sánchez De Rojas (1996) por datos espectrales que son similares al reportado en nuestro trabajo (λnm = 330, 270) y con Mabry y col. (1970) (λnm = 326, 289), por tanto, se asume que el otro flavonoide es la naringenina. Los flavonoides aislados demostraron tener actividad antioxidante al captar la radical libre DPPH tal como se muestra en el Gráfico Nº 1, tuvieron una actividad antioxidante superior al 90%, mientras que la vitamina C a las mismas concentraciones tuvo una actividad ligeramente superior y la rutina fue lige- ramente inferior. El análisis estadístico demostró que no existen diferencias estadísticas entre los flavonoides de Satureja brevicalix, la vitamina C y la rutina, pero una ligera diferencia entre las concentraciones (p 0.05)(21), en una revisión del género Satureja refieren su alto contenido de compuestos fenólicos como los flavonoides y la demostración de su actividad antioxidante. Evaluaron un extracto metanólico de las hojas de Satureja macrostema sobre el DPPH, obteniendo como resultado una actividad secuestradora de un 89.7% a 100 µg/ml meores al ácido ascórbico (97%), atribuyéndole esta actividad a los flavonoi- des del tipo flavona(22). Estos resultados son ligeramente inferiores a los obtenidos en la presente investigación. En el Gráfico 2 se muestra la variación del volumen de inflamación de los flavonoides en función del tiempo, en donde se puede apreciar que los flavonoides a la dosis de 200 mg/kg, tienen un coportamiento similar al diclofenaco, en su capacidad de disminuir la inflamación inducido por la carragenina, corroborado por las pruebas estadísticas correspondientes (p 0.05). La actividad antiinflamatoria está relacionado directamente con la actividad antioxidante, por tanto, podemos asumir que los flavonoides apigenina y naringenina aislados de las hojas de Satureja brevicalix tienen actividad antiinflamatorio por ser del tipo flavanona y flavona. Se realizaron una extensa revisión sobre las propiedades antiinflamatorias de los flavonoides, atribuyéndose esta propiedad a su estructura química, teniendo mayor actividad aquellos flavonoides que tienen grupos fenólicos libres, como es el caso de la apigenina y la naringenina, ambos con tres grupos fenólicos libres respectivamente (23). Asimismo, mencionan que la narin- genina, eriodictiol y luteolina aislados de Sa- tureja obovata, exhibieron una gran propie- dad antiespasmódica y analgésica, esta últi- ma relacionada con la actividad antiinflama- toria (21). Los flavonoides aislados de las hojas de 411 Satureja brevicalix Epl. wayra muña fueron caracterizados como la apigenina y la naringenina, siendo la apigenina el flavonoide más importante. Los flavonoides aislados demostraron tener actividad antioxidante superior al 90% y actividad antiinflamatoria a la dosis de 200 mg/kg similar al diclofenaco; y esta actividad es dependiente de su estructura química, por tener grupos fenólicos libres. REFERENCIAS BIBLIGRÁFICAS 1. Mostaceros J. y Mejia F. Taxonomía de Fanerógamas Peruanas. CNCYTEC. Lima Mendoza, J. Efecto hepatoprotector del extracto acuoso de las hojas de satureja brevicalyx epl. wayra muña en ratas. Tesis para optar Titulo de Químico Farmacéutico. UNSCH. Ayacucho Perú Bruneton J. Farmacognosia, Fitoquímica y Plantas Medicinales. Tercera Edición. Editorial Acribia. Zaragoza Kuklinski C. Farmacognosia. Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Edit. mega. Barcelona; Escudero J. y col. Secondary Metabobolites from Satureja species. Journal of Natural Products. 1985; 48: Carhuapoma M. Taxonomía de las plantas medicinales Aromáticas Nativas de la Provincia de Huamanga y sus Perspecti- vas Económicas. UNSCH. Ayacucho, Perú Sánchez De Rojas V. y col. Isolation of vasodilatary active flavonoids from the traditional remedy Satureja obovata. Planta Med. 1996; 62(3): Chumacero, A. y Col. Género Satureja (Lamiaceae) en la etnomedicina andina. Facultad de Biología, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima; Lizarraga E. y Abdala L. Compuestos fenólicos mayoritarios en Satureja boliviana (Benth.) Briq. (Lamiaceae). Acta Farm. Bonaerense. 2004; 23 (2): Soto M. Estudio fitoquímico y determinación de la actividad analgésica en diferentes extractos de la Satureja brevicalyx Epl. wayra muña. Tesis para optar Titulo de Químico Farmacéutica. UNSCH. Ayacucho Perú López - Lázaro M. Distribution and biological activities of the flavonoid luteolin. Mini-Reviews in Medicinal Chemistry. 2009; 9: Diez J. Efecto antiespasmódico de la wayra muña satureja brevicalyx epl sobre íleo aislado de rata. Instituto de Investigación de la Facultad de Ciencias Biológicas. UNSCH. Ayacucho Palomino R. Efecto antioxidante del extracto acuosos liofilizado de las hojas de las Satureja brevicalyx Epl. wayra muña. Tesis para optar titulo de Químico Farmacéutico. UNSCH. Ayacucho, Perú Aguilar E. Estudio de los flavonoides aislados de las hojas de Smallanthus sonchifolius yacon y determinación de su actividad antioxidante e inmunológica. Tesis para optar el Grado de Magíster. UNMSM. Lima Aderoga, M. y col. Isolation of two flavonoids from Bauhinia monandra (Kurz) and their antioxidative effects. Afr. J. Trad. CAM. 2006; 3 (4): Lock De Ugaz. Investigación Fitoquímica: Métodos en el estudio de los productos naturales. Fondo Editorial de la Revista IN CRESCEND - Ciencias de la Salud - Vol. 01, No 02, 2014 Pontificia Universidad Católica del Perú. Lima Suárez S. Curso de Bioquímica Vegetal. Maestría en Recursos Vegetales y Terapéuticos. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima Montaz S. y Abdollahi M. An Update on Pharmacology of Satureja Species; From Antoxidant, Antimicrobial, Antidiabetes and Anti-hyperlipidemic to Reproductive Stimulation. International Journal of Pharmacology. 2010; 6(4): CYTED. Manual de Técnicas de Investigación. Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnología para el Desarrollo Pérez R. y Gallardo Y. Antioxidant and hepatoprotective effects of the metanol extract of the leaves of Satureja macrostema. Pharmacognosy Magazine. 2010; 6(22): Shafaghat A. y Salimi F. Extraction and Determining of Chemical Structure of Flavonoids in Tanacetum parthenium (L.) Schultz. Bip. From Iran. J. Sci. I. A. U. 2008; 18(68): Middleton E. y Col. The effects of Plant Flavonoids on Mammalian Cells: Implications for Inflammation, Heart Disease and Cancer. Pharmacological Review. 2000; 52: Kemertelidze E. y col. Chemical composition and pharmacological activity of garden savory (Satureja hortensis L.) occurring in Georgia. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2004; 38(6):
Related Search
We Need Your Support
Thank you for visiting our website and your interest in our free products and services. We are nonprofit website to share and download documents. To the running of this website, we need your help to support us.

Thanks to everyone for your continued support.

No, Thanks